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科研资源管理
 
    ② 常亮技师         电话 775959
9. 基因组RNA的制备体系建立
(1)项目说明:本实验室技术人员多年从事细胞生物学实验,熟练掌握操作方法和技术,可指导建立提取真核、原核表达细胞的基因组总RNA的方法,用于RT-PCR、基因克隆、探针制备等后续工作。
(2)收费标准:1000/单个体系(院内),1000/单个体系(院外)。提供建立整个体系所需试剂,并给予技术指导。
(3)联系方式:
    ① 苏明权副主任技师 电话 775959;邮箱 jyksmq@fmmu.edu.cn
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10. 基因组RNA的提取与纯化
(1)项目说明:基于本实验室成熟的细胞生物学实验操作方法和技术,对不同来源的样本进行基因组RNA的提取,并进行纯化
(2)收费标准:150/每个标本(院内),150/每个标本(院外)。提供所需试剂,并给予技术指导。
(3)联系方式:
    ① 苏明权副主任技师 电话 775959;邮箱 jyksmq@fmmu.edu.cn
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11. cDNA合成
(1)项目说明:cDNA合成是高灵敏度RT-PCR反应系统的一部分,cDNA合成采用M-MLV反转录酶的RNase H缺失突变株取代AMV反转录酶,使合成的cDNA更长。该系统的第一链合成使用M-MLV反转录酶,cDNA第二链合成采用置换合成法,采用RNaseHDNA聚合酶Ⅰ进行置换合成,最后用T4 DNA聚合酶切去单链末端,方法简便易行。本实验室利用商品化的反转录试剂盒对提取的RNA模板进行cDNA的合成,为下一步的RT-PCR反应提供模板。
(2)收费标准:500/次(院内),500/次(院外)。提供所需试剂,并给予技术指导。
(3)联系方式:
    ① 苏明权副主任技师 电话 775959;邮箱 jyksmq@fmmu.edu.cn
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12. 琼脂糖凝胶电泳
(1)项目说明:琼脂糖凝胶电泳可完成DNA制备及浓度测定、目的DNA片段的分离,重组子酶切鉴定等。一般样品投入量达50~100ng/带即可观察到清晰结果,而对于珍贵DNA样品则上样量达电泳的最低分辨率5~10ng/带也可。电泳结果用溴化乙锭(EB)染色后可直接在紫外下观察,并且可观察的DNA条带浓度为纳克级,而且整个过程一般1小时即可完成,操作简便和快速。本实验室可以提供完整的项目设计以及实验室技术支持、数据的分析。
(2)收费标准:100元/次(院内),120元/次(院外)。
(3)联系方式:
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13. 限制性内切酶酶切鉴定
(1)项目说明:限制性核酸内切酶能特异的结合被识别序列的DNA序列,并切割双链DNA。采用琼脂糖凝胶电泳鉴定酶切效果。
(2)收费标准:150/每个标本(院内),150/每个标本(院外)。提供所需试剂,并给予技术指导。
(3)联系方式:
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14. 凝胶回收
(1)项目说明:胶回收是利用磁硅球对DNA的吸附性,能简便地在短时间内抽提出60bp50kbDNA(DNA溶液约5分钟,琼脂糖凝胶约15分钟)。能从琼脂糖凝胶中以平均70%以上得率回收高纯度的DNA,纯化后的DNA中不包含蛋白质和盐等杂质。回收的DNA可以直接用于PCR产物的测序、限制酶处理、连接反应等多种用途。
(2)收费标准:1000/单个体系(院内),1000/单个体系(院外)。提供建立整个体系所需试剂,并给予技术指导。
(3)联系方式:
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15. DNA连接酶载体连接
(1)项目说明:DNA连接酶催化DNA5'磷酸基与3'羟基之间形成磷酸二酯键而将DNA片段连接起来。在基因工程中最常用的是T4噬菌体DNA连接酶。
(2)收费标准:500/次(院内),500/次(院外)。提供所需试剂,并给予技术指导。
(3)联系方式:
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16. 重组DNA转化
(1)项目说明:完成了DNA连接反应后,在反应混合物中即含有DNA重组体。这些重组体必须导入宿主细胞后才能扩增繁殖,并进而进行筛选和鉴定。转化就是指细菌细胞的感受态捕获和复制质粒载体DNA的过程。通过转化进入细胞的DNA可以同宿主菌重组,或者进行独立的复制。
(2)收费标准:500/次(院内),500/次(院外)。提供所需试剂,并给予技术指导。
(3)联系方式:
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(二)蛋白质技术功能单元
具体位置:西京医院检验科实验室2楼
单元简介:本实验室在蛋白质分析和检测上具有雄厚的实力,拥有Bio-rad蛋白电泳分析仪、Bio-rad半干转印仪、Odessey红外成像分析仪、酶联免疫分析仪GE双向蛋白电泳系统,适用于各种蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳、转印、Western Blot检测、酶联免疫检测工作和差异蛋白分析等。
可提供:蛋白质表达和纯化;免疫荧光检测;ELISA检测;Western检测等服务。
开放实验项目:
1.    表达蛋白制备与纯化
(1)项目说明:本实验室拥有BioLogic蛋白纯化分析系统,可提供目的蛋白的制备和一步亲和层析法纯化制备好的目的蛋白。
(2)收费标准:4000/次(院内),4000/次(院外)。提供所需试剂,并给予技术指导。
(3)联系方式:
    ① 苏明权副主任技师 电话 775959;邮箱 jyksmq@fmmu.edu.cn
    ② 肖凤静医师       电话 775959
2. 聚丙酰凝胶电泳
(1)项目说明:聚丙酰凝胶电泳可根据不同蛋白质分子大小的差异分离鉴定蛋白质,也可鉴定蛋白质分离样品的纯化程度,还可根据迁移率大小测定蛋白质亚基的分子量。本实验室拥有Bio电泳仪,并熟练掌握蛋白电泳实验技术,可以提供完整的电泳技术以及后期的数据分析,图像的采集。
(2)收费标准:100元/次(院内),120元/次(院外)。
(3)联系方式:
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    ② 杨静实验师       电话 775959
3.免疫荧光检测方法建立
(1)项目说明:免疫荧光检测是将已知抗体或抗原标记上荧光素,用此特异性试剂,浸染含有相应抗原或抗体的组织细胞标本,借助抗原抗体的特异性结合,于抗原或抗体的存在部位呈现荧光,从而可以定位标本内的抗原或抗体。本实验室可提供建立基于融合表达或蛋白质标记的免疫荧光检测方法。

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